ప్రాథమిక పరిచయం
ఎర్ర రక్త కణాలను తొలగించడానికి ఎరిథ్రోసైట్ లైసేట్ చాలా సులభమైన మరియు సులభమైన పద్ధతుల్లో ఒకటి, అంటే ఎర్ర రక్త కణాలను లైసేట్తో విభజించడం, ఇది న్యూక్లియేటెడ్ కణాలను నాశనం చేయదు మరియు ఎర్ర రక్త కణాలను పూర్తిగా తొలగించగలదు. లైసేట్ క్లీవేజ్ అనేది తేలికపాటి ఎర్ర రక్త కణాల తొలగింపు పద్ధతి, ఇది ప్రధానంగా ఎంజైమ్ జీర్ణక్రియ ద్వారా చెదరగొట్టబడిన కణజాల కణాల విభజన మరియు శుద్దీకరణ, లింఫోసైట్లను వేరు చేయడం మరియు శుద్ధి చేయడం మరియు కణజాల ప్రోటీన్ మరియు న్యూక్లియిక్ ప్రయోగాలలో ఎర్ర రక్త కణాల తొలగింపు కోసం ఉపయోగిస్తారు. యాసిడ్ వెలికితీత. ఎర్ర రక్త కణాల లైసేట్ ద్వారా పొందిన కణజాల కణాలు ఎర్ర రక్త కణాలను కలిగి ఉండవు మరియు ప్రాథమిక సంస్కృతి, సెల్ ఫ్యూజన్, ఫ్లో సైటోమెట్రీ, న్యూక్లియిక్ యాసిడ్ మరియు ప్రొటీన్ల విభజన మరియు వెలికితీత మొదలైన వాటికి మరింతగా ఉపయోగించవచ్చు.
ఉపయోగం కోసం సూచనలు
కణజాల కణ నమూనా
1. తాజా కణజాలాలు ప్యాంక్రియాస్/ఎంజైమ్ లేదా కొల్లాజినేస్ ద్వారా జీర్ణం చేయబడ్డాయి మరియు సింగిల్ సెల్ సస్పెన్షన్గా చెదరగొట్టబడ్డాయి మరియు అపకేంద్రీకరణ ద్వారా సూపర్నాటెంట్ విస్మరించబడుతుంది.
2. 4â వద్ద రిఫ్రిజిరేటర్ నుండి ELS లైసేట్ను తీసుకోండి, 1:3-5 నిష్పత్తిలో సెల్ అవక్షేపానికి ELS లైసేట్ను జోడించండి (1ml సెల్కి 3-5ml లైసేట్ను జోడించండి), మెల్లగా ఊదండి మరియు కలపండి.
3. 5-8 నిమిషాలు 800-1000rpm వద్ద సెంట్రిఫ్యూజ్ చేయండి మరియు ఎగువ ఎరుపు స్పష్టమైన ద్రవాన్ని విస్మరించండి.
4. అవక్షేపించిన భాగాన్ని 2-3 సార్లు హాంక్ యొక్క ద్రావణం లేదా సీరం-రహిత కల్చర్ సొల్యూషన్తో సేకరించి సెంట్రిఫ్యూజ్ చేశారు.
5, క్రాకింగ్ పూర్తి కాకపోతే/పూర్తిగా లేకపోతే 2 మరియు 3 దశలను పునరావృతం చేయవచ్చు.
6. తదుపరి ప్రయోగాల కోసం పునఃసృష్టి కణాలు; RNA సంగ్రహించబడినట్లయితే, DEPC నీటిని ఉపయోగించి దశ 4 నుండి తయారు చేయబడిన ద్రావణంలో అలా చేయడం ఉత్తమం
ఎర్ర రక్త కణాలు చాలా తక్కువ జీవిత చక్రం కలిగి ఉంటాయి, కేవలం 120 రోజులు మాత్రమే, కానీ అవి రక్తాన్ని చాలా త్వరగా పునరుత్పత్తి చేస్తాయి, మరియు ఈ సందర్భంలో అవి కణ విభజనను ప్రత్యేకంగా కలిగి ఉంటాయి మరియు అవి అన్నింటికంటే వేగంగా విభజించే కణాలు, కాబట్టి ఈ కణం చాలా విలువైనది, కాబట్టి ఇది కణ సంస్కృతికి చాలా ఉపయోగకరంగా ఉంటుంది. ఇది చాలా సులభం, దానిలో ఎటువంటి అవయవాలు లేవు, కేవలం కణ త్వచాలు మరియు ప్రోటీన్లు.