ELISA కిట్ యాంటిజెన్ లేదా యాంటీబాడీ యొక్క ఘన దశ మరియు యాంటిజెన్ లేదా యాంటీబాడీ యొక్క ఎంజైమ్ లేబులింగ్ ఆధారంగా రూపొందించబడింది. ఘన క్యారియర్ యొక్క ఉపరితలంతో కట్టుబడి ఉన్న యాంటిజెన్ లేదా యాంటీబాడీ ఇప్పటికీ దాని రోగనిరోధక చర్యను కలిగి ఉంటుంది మరియు యాంటిజెన్ లేదా యాంటీబాడీ అని లేబుల్ చేయబడిన ఎంజైమ్ దాని రోగనిరోధక చర్య మరియు ఎంజైమ్ కార్యాచరణ రెండింటినీ కలిగి ఉంటుంది. నిర్ధారణ సమయంలో, పరీక్షలో ఉన్న నమూనా (దీనిలో యాంటీబాడీ లేదా యాంటిజెన్ కొలుస్తారు) ఘన క్యారియర్ యొక్క ఉపరితలంపై ఉన్న యాంటిజెన్ లేదా యాంటీబాడీతో ప్రతిస్పందిస్తుంది. ఘన క్యారియర్పై ఏర్పడిన యాంటిజెన్-యాంటీబాడీ కాంప్లెక్స్ కడగడం ద్వారా ద్రవంలోని ఇతర పదార్ధాల నుండి వేరు చేయబడుతుంది.
ఎంజైమ్-లేబుల్ యాంటిజెన్లు లేదా యాంటీబాడీలు జోడించబడతాయి, ఇవి ప్రతిచర్య ద్వారా ఘన వాహకానికి కూడా కట్టుబడి ఉంటాయి. ఈ సమయంలో, ఘన దశలో ఉన్న ఎంజైమ్ మొత్తం నమూనాలోని పదార్ధం మొత్తానికి అనులోమానుపాతంలో ఉంటుంది. ఎంజైమ్ రియాక్షన్ యొక్క సబ్స్ట్రేట్ని జోడించిన తర్వాత, సబ్స్ట్రేట్ ఎంజైమ్ ద్వారా ఉత్ప్రేరకపరచబడి రంగు ఉత్పత్తులుగా మారుతుంది. ఉత్పత్తి మొత్తం నేరుగా నమూనాలో పరీక్షించిన పదార్ధం యొక్క మొత్తానికి సంబంధించినది, కాబట్టి రంగు యొక్క లోతు ప్రకారం గుణాత్మక లేదా పరిమాణాత్మక విశ్లేషణ నిర్వహించబడుతుంది.
ఎంజైమ్ల యొక్క అధిక ఉత్ప్రేరక సామర్థ్యం రోగనిరోధక ప్రతిస్పందన యొక్క ఫలితాలను పరోక్షంగా పెంచుతుంది, ఇది పరీక్షను అత్యంత సున్నితంగా చేస్తుంది. ELISA యాంటిజెన్లను గుర్తించడానికి ఉపయోగించవచ్చు, కానీ ప్రతిరోధకాలను గుర్తించడానికి కూడా ఉపయోగించవచ్చు.
ELISA కిట్ యొక్క ప్రాథమిక సూత్రాలు
ఇది ఆబ్జెక్ట్ను ఎంజైమ్కి కనెక్ట్ చేయడానికి యాంటిజెన్ మరియు యాంటీబాడీ యొక్క నిర్దిష్ట ప్రతిచర్యను ఉపయోగిస్తుంది, ఆపై పరిమాణాత్మక నిర్ణయం కోసం ఎంజైమ్ మరియు సబ్స్ట్రేట్ మధ్య రంగు ప్రతిచర్యను ఉత్పత్తి చేస్తుంది. కొలత వస్తువు యాంటీబాడీ లేదా యాంటిజెన్ కావచ్చు.
ఈ నిర్ధారణ పద్ధతిలో మూడు కారకాలు అవసరం:
â సాలిడ్ ఫేజ్ యాంటిజెన్ లేదా యాంటీబాడీ (రోగనిరోధక యాడ్సోర్బెంట్)
â¡ ఎంజైమ్ లేబుల్ చేయబడిన యాంటిజెన్ లేదా యాంటీబాడీ (మార్కర్)
⢠ఎంజైమ్ చర్య కోసం సబ్స్ట్రేట్ (రంగు అభివృద్ధి ఏజెంట్)
కొలతలో, యాంటిజెన్ (యాంటీబాడీ) మొదట ఘన వాహకానికి కట్టుబడి ఉంటుంది, కానీ ఇప్పటికీ దాని రోగనిరోధక చర్యను కలిగి ఉంటుంది, ఆపై యాంటీబాడీ (యాంటిజెన్) మరియు ఎంజైమ్ల సంయోగం (మార్కర్) జోడించబడుతుంది, ఇది ఇప్పటికీ దాని అసలు రోగనిరోధక చర్య మరియు ఎంజైమ్ను కలిగి ఉంటుంది. కార్యాచరణ. ఘన క్యారియర్పై యాంటిజెన్ (యాంటీబాడీ)తో సంయోగం చర్య జరిపినప్పుడు, ఎంజైమ్ యొక్క సంబంధిత సబ్స్ట్రేట్ జోడించబడుతుంది. అంటే, ఉత్ప్రేరక జలవిశ్లేషణ లేదా REDOX ప్రతిచర్య మరియు రంగు.
అది ఉత్పత్తి చేసే రంగు యొక్క నీడ కొలవవలసిన యాంటిజెన్ (యాంటీబాడీ) మొత్తానికి అనులోమానుపాతంలో ఉంటుంది. ఈ రంగు ఉత్పత్తిని కంటితో, ఆప్టికల్ మైక్రోస్కోప్, ఎలక్ట్రాన్ మైక్రోస్కోప్ ద్వారా గమనించవచ్చు, స్పెక్ట్రోఫోటోమీటర్ (ఎంజైమ్ లేబుల్ పరికరం) ద్వారా కూడా కొలవవచ్చు. పద్ధతి సరళమైనది, అనుకూలమైనది, వేగవంతమైనది మరియు నిర్దిష్టమైనది.